中药复方脂肝乐抗大鼠脂肪肝的作用

［Abstract］ Objective: To explore the curative effect of Chinese herbal compounds, Zhiganle to hepatic adiposis in rats induced by high fat diet, and to study its mechanism. Method: Wistar rats were randomly divided into 6 groups: Normal control （NC）, pathological model （PM）, Dongbaogantai treated group （DT）, and 3 Zhiganle treatment groups that received different dosages of Zhiganle （ZT1 1.5 g·kg-1·d-1, ZT2 3.0 g·kg-1·d-1, and ZT3 4.5 g·kg-1·d-1）. All the experimental rats except those in group NC, were given high fat diet for 12 weeks and then fed with normal diet. Began in the 13th week, rats in group DT were administered with Dongbaogantai（0.3 g·kg-1·d-1）, and rats in groups ZT1, ZT2, and ZT3 received Zhiganle for other 12 weeks. Rats in NC were given normal saline instead. Finally, all the rats were executed, and their serum triglyceride （TG）, serum total cholesterol （T-CH）, hepatic TG, hepatic T-CH, glutathione （GSH）, malonaldehyde （MDA） and hepatic pathological changes were checked. Results: Levels of serum TG, serum T-CH, hepatic TG, hepatic T-CH, and MDA were clearly higher （P<0.01 or P<0.05） and GSH level obviously lower （P<0.01 or P<0.05） in group PM than those in group NC; the levels of serum TG, serum T-CH, hepatic TG, hepatic T-CH, and MDA in treatment groups were clearly lower （P<0.01 and P<0.05） and GSH level in the liver remarkably higher （P<0.01 and P<0.05） than those in group PM. Hepatic pathological changes were lightened in treated groups than those in group PM. Conclusion: Zhiganle has good treating effects on hepatic adiposis in rats induced by high fat diet.

　　［Key words］ fatty liver; lipid peroxidation; ready-made patent drugs; rats,Wistar; Zhiganle

    脂肪肝是由多种疾病和原因引起的肝脏脂肪变性。国内外学者认为当肝细胞合成甘油三酯（TG）及分泌极低密度脂蛋白（VLDL）不平衡时，脂肪肝就会形成。对于脂肪肝的治疗，目前临床上尚缺乏较满意的药物。已报道的考来烯胺、烟酸肌醇酯、苯扎贝特、吉非罗齐等药物虽然可以从不同环节抑制脂肪肝，但不良反应多、疗程长，故临床应用受到限制［1］。根据传统中医理论活血化瘀、疏肝解郁、健脾化湿研制出的中药复方脂肝乐（简称ZGL）是由草决明、山楂、泽泻等多味中药组成，临床已试用于治疗脂肪肝患者，取得了较好疗效。由于营养因素在脂肪肝的发生发展中占有主要地位，因此，2005年9月～2006年3月采用高脂饲料诱导大鼠脂肪肝模型，观察了ZGL对脂肪肝的治疗作用并对其部分作用机制进行了探讨。

　　1  材料与方法

　　1.1  动物雄性Wistar大鼠，120只，体重（150±20）g，贵阳动物实验中心提供，合格证号：SCXK（黔）2002-0001。

　　1.2 药品及试剂ZGL由内蒙古鄂尔多斯市第二人民医院提供，批号：020816，为棕色圆形颗粒制剂，临用前将颗粒研磨成粉末，用蒸馏水配制成所需浓度使用，溶液pH=6.5。东宝肝泰片，通化东宝药业股份有限公司生产，批准文号：吉卫药准字（1996）第430110号，配制方法同上。胆固醇（化学纯，进口分装），中国医药分公司北京采购供应站经销，批号020908。血清及肝脏生化指标检测试剂盒，北京中山生物技术有限公司生产。其余化学试剂均为分析纯。

　　1.3  复制脂肪肝动物模型高脂饲料（玉米粉79.5%、猪油20.0%、胆固醇0.4%、胆盐0.1%）, 动物自由取食，持续12周，复制大鼠脂肪肝动物模型。颈动脉放血法处死各组大鼠5只，取肝左叶同一部位组织，常规HE染色，光镜观察，脂变细胞占肝小叶的1/2～2/3或2/3以上，细胞增大或肿胀，胞浆内充满脂滴空泡，肝窦狭窄、极度狭窄甚至闭塞，表明造模成功。

　　1.4  分组与给药　　

　　Wistar大鼠按体重随机分为6组：正常组、模型组及ZGL低剂量、中剂量、高剂量组和东宝肝泰组。除正常对照组外，其余各组均复制脂肪肝模型。12周后终止病因刺激，开始灌胃给药，ZGL低剂量、中剂量、高剂量为1.5、3.0、4.5 g·kg-1·d-1（分别相当于临床给药量的5倍、10倍、15倍），东宝肝泰组为0.3 g·kg-1·d-1（相当于临床给药量5倍），脂肪肝模型组和正常对照组每天灌服等容量的生理盐水，连续给药12周，实验结束时，动物禁食24 h，颈动脉放血法处死动物，取血清及肝组织检测相应指标。

　　1.5  检测指标与方法 

　　1.5.1  生化指标检测

　　取大鼠血清检测TG、总胆固醇（T-CH）；大鼠肝组织检测TG、T-CH、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）。GSH检测用二硫对硝基苯甲酸法［2］。

　　1.5.2  病理学检测方法及指标

　　取肝左叶同一部位组织，常规HE染色，光镜观察，并参照文献制定肝脏脂肪半定量标准。-： 未见明显脂变；+： 脂变细胞占肝小叶的1/3以下；++: 脂变细胞占肝小叶的1/3～1/2；+++： 脂变细胞占肝小叶的1/2～2/3，细胞明显增大，胞浆内充满大小不等空泡，肝窦明显狭窄；++++： 脂变细胞占肝小叶的2/3以上，细胞肿胀，胞浆内充满脂滴空泡，肝窦极度狭窄甚至闭塞。

　　1.6  统计学处理实验数据以x±s表示，两小样本均数的比较计量资料采用t检验，计数资料采用秩和检验。
2  结果

　　2.1  ZGL对高脂、高胆固醇所致肝脂肪变性的影响

　　模型组大鼠出现明显的肝细胞脂肪变，各给药组肝脂肪变均较模型组明显减轻（P<0.01，P<0.05），其中以低剂量组减轻极为显著（P<0.01）。见表1。表1  中药复方脂肝乐对大鼠肝脂肪变性程度的影响（略）

　　2.2  ZGL对肝脏、血清T-CH及TG含量的影响

　　2.2.1  T-CH 含量

　　模型组大鼠肝脏、血清T-CH含量升高，与正常组比较差异有显著性（P<0.01）；ZGL低剂量组降低肝脏、血清T-CH与模型组比较差异有显著性（P<0.05），见表2。

　　2.2.2  TG含量

　　模型组大鼠肝脏、血清TG含量升高明显，与正常组比较差异显著（P<0.01，P<0.05）；ZGL各给药组肝脏TG含量降低，与模型组相比均有极显著性差异（P<0.01）。ZGL各给药组及东宝肝泰组血清TG含量降低，低剂量组降低血清TG含量最为明显，统计结果显示差异极为显著（P<0.01），见表2。表2  中药复方脂肝乐对脂肪肝大鼠血清、肝脏T-CH、TG水平的影响（略）
 
　　2.3  ZGL对大鼠肝脏MDA、GSH含量的影响

　　模型组大鼠肝脏MDA含量较正常组明显升高，脂肝乐高、中、低剂量组及东宝肝泰组MDA含量均有降低，与模型组比较差异有极显著性（P<0.01）；与正常组相比，模型组大鼠肝脏GSH含量明显降低，差异极为显著（P<0.01），各给药组肝脏GSH含量均有升高，且程度相似，统计结果表明，差异极为显著（P<0.01）。见表3。表3  中药复方脂肝乐对大鼠肝脏MDA、GSH含量的影响（略）

　　2.4  病理学检查肉眼观察：模型组肝脏较正常组体积增大，胞膜紧张，色泽黄腻，呈典型脂肪变。治疗组肝脏体积、色泽与正常组接近；镜下观察：正常组肝细胞以中央静脉为中心向周围呈放射状排列，肝细胞呈多面体形，核大而圆，位于细胞中央，肝细胞未见浊肿、脂肪变或坏死；模型组均可见中至重度肝细胞脂肪变，肝小叶结构紊乱，胞浆内充满脂滴大空泡或泡沫样脂滴空泡，细胞肿胀，细胞核被挤向细胞周边，肝窦极度狭窄或闭塞,并可见散在性肝细胞碎屑样坏死和灶状坏死，偶见中央静脉周围纤维增厚及窦周纤维化，内有少量淋巴细胞浸润； ZGL治疗组肝细胞变性程度明显轻于模型组，脂肪性变肝细胞多个单个散在或3、5个细胞成簇分布，有网状脂滴空泡，其形态、大小、数量较模型组低。

　　3  讨论　　

　　中药复方制剂ZGL是由草决明、山楂、泽泻等多味中药组成。已有实验证明，草决明有降低胆固醇及甘油三酯，防止其肝内沉积的作用［3］。有学者对草决明不同活性部位的调脂作用进行比较研究,均证实具有抗疲劳、抗氧化和降低血脂的作用［4］。现代实验研究已经证明，山楂不同提取部位对不同动物造成的各种高脂模型均有肯定的降脂作用,山楂中的雄果酸和金丝桃苷具有明显的降低胆固醇、调节血脂和提高血清超氧化物歧化酶（SOD）活性的药效作用［5～7］；泽泻提取物可明显提高血清及肝脏SOD活力，提高肝脏的谷胱甘肽过
   
　　在局部解剖学教学引进三维重建技术构建人体三维形态，弥补了当前尸体标本缺乏、二维图片难以显示空间结构等不足，大大提高了我校学生的学习质量，显著提高了教学水平［6］。及格率由2004级的71%上升到2005的97%，平均分也由2004级的65.63上升到77.93，学生的成绩有了显著提高。4

【参考文献】
  　　［1］周波,文敏,李宏伟,等.应用计算机Maya技术制作人眼球解剖学教学课件［J］.贵阳医学院学报,2007（2）:200-201.

　　［2］丁占彪,崔英健,陶伟,等.目前局部解剖学实验教学面临的问题与探讨［J］.教育教学研究，2007（35）：38.

　　［3］周波,文敏,李宏伟,等.解剖学课件中动态过程的虚拟［J］.四川解剖学杂志,2006（1）:50.

　　［4］邱明国,张绍祥,刘正津,等.数字化可视人体在解剖学教学中的初步应用［J］.四川解剖学杂志,2004（1）:41-42.

　　［5］李鉴铁,赵卫东,张美超,等.医学影像资料三维重建及在解剖学教学中的应用［J］.解剖学研究,2007（2）:154-155.

　　［6］周波,文敏,李宏伟,等.运用虚拟现实技术制作解剖学教学课件及体会［J］.解剖学杂志,2007（5）:664-665.